- SCIENTZ-2C基因导入仪(智能型)
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产品说明
SCIENTZ-2C基因导入仪由仪器主机、基因导入杯及连接线等组成。主要是利用电转化来将DNA转入受态细菌、动植物细胞、酵母细胞中。与其它方法相比，基因导入仪法具有高重复性，高效率、操作简易、可定量控制等优点，同时，电转没有基因毒性，已经成为不可缺少的分子生物学基本技术。
工作原理
细胞电转染（电转），也叫细胞电穿孔 (electroporation)，是把外源大分子物质DNA、RNA、siRNA、蛋白质等以及一些小分子导入细胞膜内部的重要方法。
在瞬间强大电场的作用下，溶液中细胞的细胞膜具有了一定的通透性，带电的外源物质以类似电泳的方式进入细胞膜。由于细胞膜磷脂双分子层的电阻很大，细胞外部电流场产生的细胞两极电压都被细胞膜承受，细胞质内分到的电压可以忽略不计，细胞质内部几乎没有电流，因此也决定了正常范围内的电转过程中细胞毒性很小。电场使DNA等物质进入细胞膜后只能停止在细胞膜附近，随后细胞本身的机制可以允许这些物质到细胞核等处。
由于电转技术依靠的是物理方法，细胞表面的分子特性对电转影响比较小。相比化学转染方法和病毒载体转染方法，电转可以用在所有的细胞种类上，而且容易定量控制。
细胞电转电场图 1 细胞膜近似绝缘体，细胞附近电转液中电流扭曲。 2 在串联电路中电阻越大分到电压越大，细胞两端电压基本都落在两端细胞膜上。 3 只有一个细胞端面电转有效。 4 细胞质内分到电压很小，DNA电转进入细胞膜后马上停止，后续靠细胞本身机制慢速扩散。 5 细胞核两端电压及其微小，微小的电压又落在核膜上，核内部完全没有电压，电转没有基因毒性。 |
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应用领域
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• 细菌、酵母及其他微生物的电转化 | • 导入药物、蛋白、抗体等分子对细胞的结构和功能进行研究 | • 细胞杂交、融合基因导入 |
• 导入标记基因起到标记、指示的作用 | • 哺乳动物细胞的转染、植物组织和原生质体质体的转染 |
产品特点
• 转化率高 转化时间短、重复性优异 | • 智能储存 可存储实验日志，并且自定义程序无限量存储 |
• 控制精准 采用微处理器控制的脉冲放电 | • 外形美观 整机一体化设计，显示直观，操作简单 |
实验介绍
1、LI J等人基于高通量筛选分析p53–MDM2蛋白相互作用的小分子抑制剂的研究结果。 | 2、ZHANG S Y等人发现和鉴定一个独特的G蛋白偶联受体119激动剂的研究结果 | |
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1、LI J, ZHANG S, GAO L, et al. A cell-based high-throughput assay for the screening of small-molecule inhibitors of p53-MDM2 interaction [J]. Journal of biomolecular screening, 2011.
2、ZHANG S Y, LI J, XIE X. Discovery and characterization of novel small molecule agonists of G protein-coupled receptor 119 [J]. Acta pharmacologica Sinica, 2014.
不同菌种的转化率
| 品种 | 品种 | 电容 | 电阻 | 导入盒 | 转化率 | 反馈用户名 |
| 酵母 | 1200-1500V | 25µF | 200-400Ω | 2mm | 2.2-3.2*10²cfu/ug DNA | 上海肺科医院 |
| 大肠杆菌 | 1250V | 5µF | 400-1000Ω | 1mm | 10 -10 cfu/ug DNA | 清华大学 |
| 大肠杆菌 | 1100V | 5µF | 500Ω | 1mm | 2500cfu/ug DNA | 清华大学 |
| 大肠杆菌 | 1500V | 25µF | 400Ω | 2mm | 2500cfu/ug DNA左右 | 解放军总医院 |
| 羊细胞 | 250V | 500µF | 500Ω | 4mm | 10²cfu/ug DNA | 中科院发育所 |
| 毕赤酵母 | 1500V | 25µF | 400Ω | 2mm | 1.8x10³cfu/ug DNA | 华东师范大学 |
| 枯草芽孢杆菌 | 1250V | 25µF | 400Ω | 2mm | 10²cfu/ug DNA | 华东师范大学 |
备注：因各单位实验条件不尽相同，以上实验参数仅供参考
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